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目的通过体外研究姜黄素(CURCUMIN)联合紫杉醇(PACLITAXEL,PTX)对人肺腺癌A549细胞的作用,探讨两药联合对A549细胞的生物学效应的影响,并探讨其可能的机制。方法(1)人肺腺癌A549细胞的培养以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基,置于饱和湿度、CO2浓度为5、温度为37℃的恒温培养箱中培养。(2)分组及处理设置对照组(不加入任何药物)、DMSO组、姜黄素组、紫杉醇组、姜黄素联合紫杉醇组,当细胞培养至对数期处理后,DMSO组给予与姜黄素组同浓度的DMSO溶液,姜黄素组给予姜黄素浓度为20ΜMOL/L,紫杉醇组给予紫杉醇浓度为4NMOL/L,联合组姜黄素浓度为20ΜMOL/L,紫杉醇浓度为4NMOL/L分别处理。(3)MTT法分别计算紫杉醇及姜黄素的IC50取对数期A549细胞接种于96孔板,贴壁生长24小时后分别加入浓度为05NMOL/L、1NMOL/L、2NMOL/L、4NMOL/L、8NMOL/L的紫杉醇,浓度为5UMOL/L、10UMOL/L、20UMOL/L、40UMOL/L、80UMOL/L的姜黄素后继续培养48小时,检测各浓度的IOD值,并计算紫杉醇及姜黄素IC50(半数抑制浓度)。(4)MTT实验取对数期A549细胞接种于96孔板,贴壁生长24小时后按分组条件处理后继续培养48小时,检测各组IOD值,计算增殖抑制率及两药联合的Q值。(5)细胞周期及凋亡检测将A549细胞培养至对数期,按分组条件处理后继续培养48H,采用流式细胞仪分别检测各组细胞周期分布及细胞凋亡率。(6)将A549细胞接种于6孔板,待细胞单层铺满板底时进行划痕后,按分组条件处理,继续培养48小时观察细胞迁移情况,并计算各组细胞迁移距离。(7)制好MATRIGEL膜后,取对数期A549细胞制成无血清细胞悬液加入TRANSWELL小室上室,按分组条件加入对应药物处理后48小时,取出小室进行染色并计算穿膜细胞数。(8)采用酶联免疫吸附试验检测各组处理后48小时HIF1Α及VEGF表达情况。结果(1)紫杉醇作用于A549细胞48小时的IC50为4NMOL/L,姜黄素作用于A549细胞48小时的IC50为20UMOL/L。(2)姜黄素联合紫杉醇组对肺癌A549细胞的增殖具有明显的抑制作用,其抑制率明显高于对照组、紫杉醇组及姜黄素组;姜黄素联合紫杉醇对肺癌A549细胞的抑制作用具有协同作用,其Q值为1072338。(3)DMSO组细胞周期分布与对照组无明显差异(P005),姜黄素组细胞阻滞于S期及G2/M期,紫杉醇组细胞阻滞于G2/M期,联合用药组细胞阻滞于G0/G1期及S期。(4)DMSO组凋亡率与对照组凋亡率无明显差异(P005),与对照组比较各实验组凋亡率均高于对照组,联合用药组凋亡率高于其他各组,差异具有统计学意义(P(5)与对照组比较,姜黄素组、紫杉醇组及联合用药组的迁徙距离及穿膜细胞数明显小于对照组,姜黄素组及紫杉醇组的差异无统计学意义(P005);联合用药组的迁徙距离及穿膜细胞数明显小于姜黄素组及紫杉醇组,差异具有统计学意义(P(6)DMSO组HIF1Α和VEGF的表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P005);姜黄素组、紫杉醇组及联合用药组HIF1Α及VEGF的表达水平明显低于对照组,且各实验组间比较差异具有统计学意义(P结论(1)姜黄素联合紫杉醇能显著抑制肺癌A549细胞的增殖及侵袭转移能力,促进细胞凋亡;两药联合对肺癌A549细胞的作用具有协同效应。(2)姜黄素联合紫杉醇能显著下调HIF1Α及VEGF的表达,姜黄素联合紫杉醇对肺癌A549细胞的增殖、凋亡及侵袭转移能力的影响可能与其下调HIF1Α及VEGF的表达相关。